液相色譜儀驗證

1．液相色譜儀介紹

液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離，然后分析鑒定物質成分及含量的儀器。高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合，HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。由于HPLC具有高分辨率、 高觀靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易先收集等優點，因而被廣泛應用的生物化學，食品分析，醫藥研究，環境分析，無機分析等各種領域。

2．液相色譜儀的原理

液相色譜儀由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。

3．為什么液相色譜儀要做驗證呢？

這是為了保證液相色譜儀分析檢測結果準確、可靠，所以必須對所用到的組成系統各部分進行驗證，以證明該系統符合檢測的目的和要求，這就是儀器驗證。從本質上講，儀器驗證就是根據檢測物質的要求，預先對儀器設置一定的參數范圍及合適的檢測器，并通過設計合理的試驗來驗證該儀器是否符合檢測項目的要求。儀器驗證是保證整個試驗是否能成功的先決條件，只有經過驗證的儀器，確保該儀器各部分都在良好的情況下才能用于物質成分的分析檢測，這樣使檢測結果更準確，盡可能減小誤差。

4．液相色譜儀的驗證項目

（1）安裝確認

a. 文件確認

b. 附件確認

c. 安裝環境確認

d. 安裝情況確認

（2）運行功能確認

a. 運行功能確認

b. 軟件控制功能測試

c. 流速設定誤差測試

d. 流速重復性測試

e. 柱溫設定誤差測試

f. 柱溫穩定性測試

（3）性能確認

a. 基線噪聲測試

b. 基線漂移測試

c. 檢測限測試

d. 重復性測試

5．液相色譜儀使用的注意事項如下

（1）流動相均需色譜純度，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質（使用0.45μm或更細的膜過濾）。

（2）流動相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應該恢復到室溫后使用，脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。

（3）不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。

（4）長時間不用儀器，應該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應該用有機相(如，甲醇等)，因為，純水易長霉。

（5）更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗，然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。

公司背景介紹：

澤恒.華譜在計量校準、驗證與確認的優勢是專注做生物制藥質控服務，針對一些特殊的儀器都非常熟悉，核心團隊來源于制藥公司和儀器廠家，對儀器和GMP法規都很熟悉，比如：我們團隊專門研發了替代進口的熒光定量PCR儀校準裝置，大大降低熒光定量/定性PCR儀校準的成本（遠低于同行）；我們開發了細胞計數儀的校準內部規程；開發了細胞復蘇儀的內部校準規程；開發了凝膠電泳掃描儀的校準規程；我們開發了溫度驗證所需要的超低溫和超高溫一體化無線探頭，降低用戶大量使用探頭時的成本，代替了進口；這些例子還有很多，因為我們都是生物出身，所以我們關注每一個生物用戶工藝要求，在生物制藥儀器設備上面專注，“與質量同行、做儀器設備質控"，為了讓生物制藥更安全而努力。

我們在服務上與其它單位密切合作，包括強檢、特檢或做不了的都幫客戶代送代取，省時、省力、方便客戶。

澤恒.華譜是專注于為生物制藥行業提供實驗室儀器計量校準、儀器設備驗證與驗證/廠房驗證的專業服務商。我們給制藥客戶解決的是一站式QC/QA/工程部/驗證部/生產部的質控外包服務。