摘要：目的建立參茸膠囊中人參皂苷Rgl、人參皂苷Re的含量測(cè)定方法。方法采用液相色譜法，色譜柱為Kromasil 5μmC18柱（4.6mm×200mm，5μm），流動(dòng)相為0.05％磷酸-乙腈（80：20），流速為1.Om1/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm。結(jié)果人參皂苷Rgl進(jìn)樣量在0.990～6.600μg的范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9998；人參皂苷Re進(jìn)樣量在0.816～5.440μg的范圍內(nèi)與峰面積也呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9998。平均回收率分別為Rgl=98.51％、Re=98.50％；RSDRgl=0.82％，RSDRe=1.07％。結(jié)論本方法簡(jiǎn)便快速，分離度好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
    關(guān)鍵詞：參茸膠囊；人參皂苷Rgl、人參皂苷Re；液相色譜法；藥物研究
    Determination of Ginsenoside in ShenrongCapsule by HPLC
    Song Xiao Cui Chunli
    Abstract：Objective To determine Ginsenosidein Shenrong Capsule by HPLC．Methods Samples were purifled by C18column．HPLC comumn was Dikma Diamonsil Cl8（4.6mm×200mm，5μm），phase was 0.05％phosphate-Acetonitrile（80：20），flow rate was 1.0m1/min and detection wavelength was 203nm．Results
The calibration curve was linear in the range of 0.990～6.600μg forGinsenoside Rgl（r=0.9998）；The calibration curve was linear in therange of 0.816～5.440μg for Ginsenoside Re（r=0.9998）too．The averagerecovery were Rgl：98.51％ 、Re=98.50％ ．RSD were 0.82％ and 1.07％．Conclusion：The method with good separation isconwenient，rapid，accurate and reliable．
    Key words：Shenmng Capsule；GinsenosideRgl、Ginsenoside Re：HPLC
    參茸膠囊由生曬參、鹿茸、狗腎等五味中藥組成。具有益氣壯陽(yáng)的功效。方中君藥生曬參主要含有人參皂苷類成分，還含有揮發(fā)性成分，有機(jī)酸及酯，甾醇及苷，蛋白質(zhì)，酶類，維生素類，無機(jī)元素，木質(zhì)素，糖類等成分。對(duì)于人參皂苷Rgl、人參皂苷Re的含量測(cè)定研究，近年來主要有分光光度法、薄層掃描法和液相色譜法，參考藥典中人參藥材的含量測(cè)定方法，zui終采用液相色譜法建立了適合本制劑的含量測(cè)定方法。該法靈敏、專屬?gòu)?qiáng)、簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性良好。
    1．儀器與試藥
    1．1儀器 高效/液相色譜儀/（美國(guó)Waters公司，配Waters600泵，Waters 2487雙波長(zhǎng)檢測(cè)器）。
    1．2試藥參茸膠囊由寧夏自治區(qū)銀川紫金花藥業(yè)提供（批號(hào)分別為：040218、040222、040226），人參皂苷Rgl、人參皂苷Re（中國(guó)藥品生物制品鑒定所，批號(hào)分別為：703—200221、754—200214）；生曬參藥材為市購(gòu)。3批樣品為自制。甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。
    2．方法與結(jié)果
    2．1色譜條件
    色譜柱為Kromasil ODSC18（5μm，4.6mm×200ram）；流動(dòng)相：0.05％磷酸-乙腈（80：20）；檢測(cè)波長(zhǎng)：203nm；柱溫：室溫；流速：lml／min；進(jìn)樣20μl。樣品中人參皂苷與其它組分均能達(dá)到基線分離，陰性對(duì)照不產(chǎn)生干擾。
    2．2線性范圍
精密稱取人參皂苷Rgl對(duì)照品3.30mg與人參皂苷Re對(duì)照品5.44mg，加甲醇分別制備成每lml含人參皂苷Rgl0.30mg，每lml含人參皂苷Re0.50mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。分別精密吸取人參皂苷Rgl、人參皂苷Re對(duì)照品溶液3、5、10、15、20μl，按上述色譜條件，注入液相色譜儀，記錄峰面積。
分別以人參皂苷Rg1、人參皂苷Re面積對(duì)進(jìn)樣量（μg）回歸，得人參皂苷Rg1回歸方程A=15108.61+108022.52C，人參皂苷Re回歸方程，A=14836.39+427474.62C，相關(guān)系數(shù)為rRgl=rRe=0.9998，人參皂苷在RglO.990-6.600μg之間和人參皂苷Re在0.816-5.440μg之間線性范圍良好。
    2．3精密度試驗(yàn)
    精密吸取供試品溶液（批號(hào)：040218）20μl，連續(xù)進(jìn)樣5次，人參皂苷RSDRg1=0.58％、人參皂苷RSD Re=0.95％。
    2．4重復(fù)性試驗(yàn)
    按擬定的含量測(cè)定方法，對(duì)同一批號(hào)樣品（批號(hào)：040218）分別制成供試品溶液，測(cè)得峰面積并計(jì)算，人參皂苷Rg1含量分別為：0.0885mg/粒，0.0887mg/粒，0.0897 mg/粒，0.0879 mg/粒，0.0886mg/粒，RSD為0.75％。人參皂苷Re含量分別為：0.0500mg/粒，0.0511mg/粒，0.0517mg/粒，0.0496mg/粒，0.0500mg/粒，RSD為1.75％ 。
    2．5穩(wěn)定性試驗(yàn)
    取供試品（批號(hào)：040218），按供試品制備方法制備樣品，分別于0h、4h及8h，進(jìn)樣20μl，結(jié)果表明樣品中人參皂苷Rg1、人參皂苷Re峰值在8h內(nèi)穩(wěn)定，RSDRg1=2.65％ 、RSDRe=1.16％ 。
    2．6回收率試驗(yàn)采用加樣回收法，取已知含量的生曬參復(fù)方制劑，分別加人參皂苷對(duì)照品，按供試品制備方法操作，同樣色譜條件測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果表明，本方法回收率良好。
    2．7樣品測(cè)定
    取本品內(nèi)容物適量，稱取7g，精密稱定，置索氏提取器中，加氯仿40ml，加熱回流4小時(shí)，棄取氯仿液，藥渣揮去氯仿，連同濾紙筒移入具塞錐形瓶中，精密加入水飽和正丁醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，用上述水飽和正丁醇補(bǔ)充減失的重量搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，置蒸發(fā)皿中蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。取三批供試品，按前述色譜條件測(cè)定。
    經(jīng)過三批含量測(cè)定結(jié)果及整個(gè)含量測(cè)定研究過程，考慮到藥材的含量及其它影響因素，暫定本品含生曬參以人參皂苷Rgl（c42H72O14）、人參皂苷Re（C48H82O18）總量計(jì)，每粒不得少于0.0500mg。
    3．討論
    3．1色譜條件選擇：利用本法測(cè)定生曬參中人參皂苷時(shí)，流動(dòng)相比例尤為重要。不能一味縮短其保留時(shí)間，而改變分離效果。當(dāng)流動(dòng)相為0.05％磷酸-乙腈（75：25）時(shí)，人參皂苷Rgl、人參皂苷Re容易重合，很容易將兩者當(dāng)成一個(gè)組分。
    3．2不同制樣方法選擇：先后采用水飽和正丁醇直接超聲處理法、先用氯仿回流脫脂，再正丁醇直接超聲處理法，以及先用氯仿回流脫脂，再正丁醇直接超聲處理，再上大孔樹脂洗脫法。結(jié)果表明：含量zui高者為本制樣法。從方法學(xué)研究的結(jié)果進(jìn)一步說明，該方法是科學(xué)可行的。
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